產地 | 上海 |
保存條件 | 2-8℃ |
品牌 | 睿創 |
貨號 | RC-E110634A |
用途 | 科研實驗 |
檢測方法 | 酶聯免疫法 |
保質期 | 6個月 |
適應物種 | 人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細胞,土壤等動植物 |
檢測限 | 詳詢 |
數量 | 99 |
包裝規格 | 96T/48T |
標記物 | HRP標記物 |
樣本 | 血清,血漿,唾液,尿液,組織,細胞上清,裂解液等 |
應用 | 定性/定量/酶活檢測 |
是否進口 | 否 |
本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷
人布病抗體(Brucellosis-Ab)ELISA試劑盒
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被布病抗體(Brucellosis-Ab)抗原的包被微孔中,依次加入標本、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并che底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中布病抗體(Brucellosis-Ab)的存在與否。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
檢測樣本:48T檢測42個樣本,96T檢測90個樣本
特色服務:提供免費代測,技術一對一指導。
檢測樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
適應物種:人,大鼠,小鼠,植物,狗,貓,蝦,魚,蟹,牛,羊,微生物,細胞,土壤等動植物
實驗須知:我司ELISA檢測試劑盒現制備僅供科研實驗,不得用于其他用途;使用前仔細閱讀ELISA試劑盒說明書
自備物品
1.酶標儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.預處理后的樣本無需稀釋,直接取50μL加樣即可。
4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。
人布病抗體(Brucellosis-Ab)ELISA試劑盒試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
1.手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2.自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL;
3.待測樣本孔加待測樣本50μL;
4.隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
1. 試驗有效性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;
陰性對照孔OD值平均值≤0.15。
2. 臨界值(Cut off)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
3. 陰性判斷:樣品OD值<臨界值(Cut off),樣品為陰性
4. 陽性判斷:樣品OD值>臨界值(Cut off),樣品為陽性
試劑盒性能
1.準確性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;陰性對照孔OD值平均值≤0.15,說明試驗結果有效。
2.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
3.重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
4.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
5.有效期:6個月
免責聲明
1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測 定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應 而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行 定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。
售前.后服務須知
* 價格問題:價格以本公司的實際報價為準;
* 產品問題:所有的商品我們公司在發貨之前都進行嚴格質檢,確保無任何問題才發貨;
* 產品屬性:下單之前或者購買之前,要與客服溝通,核對產品的屬性數量等信息確保無誤;
* 訂購方法:款到發貨,如需要請傳資料,具體細節請詳詢;
* 運輸方式:順豐快遞;
* 質優價廉:歡迎訂購,產品量大價優;
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