2024新實驗指南 :ELISA樣本處理及注意事項
ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。對于ELISA樣本的處理有很多小伙伴還不是很清楚,睿創生物為大家總結如下,希望對您的實驗有所幫助。
ELISA的檢測目的是為了實驗提供準確的實驗依據,為了保證實驗數據的可靠性,在實驗過程中必須堅持全面的質量控制和全過程質量控制,在收集標本前都必須有一個完整的計劃。
注意事項
1、每個樣本量收集體積=100ulx檢測種類,如果要做復孔,標本量收集體積=100ulx檢測種類x2。
2、樣本收集后若在一周內進行檢測可保存于2-8°C,若不及時檢測,請進行分裝,凍存于-20°或-80°C,避免反復凍融。
3、試劑盒的檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍,建議實驗前通過相關文獻預估樣本中待測物的濃度并通過預實驗確定樣本。
4、血清標本采集是應注意避免溶血,紅細胞溶解是會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,溶血標本可能會增加非特異性顯色。
5、為了保證尿液檢測的準確性,必須正確收集尿液標本和保存,收集尿液的容器必須要清潔干燥,最好使用一次性的容器,避免因用藥并清潔不到而造成的污染,尿液樣本必須新鮮,留取后,應及時檢測或保存。
6、標本宜在新鮮是檢測如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久,其中可能發生聚合,間接法ELISA中樂視本底加深。
7、反復凍融會使蛋白效價降低,所以待測樣本如需多次檢測,宜少量分裝凍存。
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