細胞培養是一種在人工控制條件下,使細胞在體外生存并增殖的技術。它對于基礎生物學研究、藥物開發、再生醫學和診斷等域至關重要。以下是一個基本的細胞培養步驟概述:
一、準備工作
* 清潔和消毒所有工作臺面、工具和培養容器,通常使用70%酒精擦拭。
* 穿戴適當的實驗室防護裝備,如實驗服、套和口罩。
二、培養基的制備
* 根據所需細胞類型,配制適宜的培養基,這通常包括基礎培養基、血清、抗生素和其他生長因子。
* 從現有細胞培養中取出一部分細胞,通常使用胰蛋白酶-EDTA溶液消化細胞。
* 將含有細胞的培養瓶放入恒溫箱中,維持適宜的溫度、濕度和CO?濃度。
* 定期觀察細胞生長情況,使用倒置顯微鏡檢查細胞形態和密度。
五、細胞收獲
* 當細胞達到適當的生長密度時,再次使用胰蛋白酶EDTA溶液消化細胞。
* 收集細胞懸液,并通過離心分離細胞。
六、細胞計數和種植
* 使用細胞計數板或自動細胞計數器計算細胞數量。
* 所有使用過的培養基、細胞懸液和其他廢棄物都應按照生物危險廢物處理規定進行處置。